بررسی اثر نسبت اتصال دهنده عرضی و غلظت کلاژن روی مدول ذخیره و اندازه تخلخل در ساخت غشاهای کلاژنی

به طور کلی بازسازی هدایت شده بافت استخوان به واسطه استفاده از غشا ها صورت می گیرد. این غشا به صورت فیزیکی از تهاجم سلوهای بافت نرم به زخم جلوگیری نموده و محیط را برای فعالیت سلولهای استخوانی مطلوب میکند. به صورت ایده آل غشا بایستی متخلل، زیست تخریب پذیر ، دارای ثبات فیزیکی و غیر سمی باشد. زیست تخریب پذیری غشا باعث می شود تا نیازی به جراحی ثانویه برای خارج کردن غشا نباشد. در این پروژه سعی بر آن شد تا ابتدا با انتخاب یک ماده مناسب به عنوان ترکیب اصلی، برخی از ویژگی های مطلوب برای غشای ایمپلنت دندانی برآورده شود. بنابراین کلاژن به عنوان ماده اصلی در ساخت غشا انتخاب شد. کلاژن به مدت 24 ساعت در استیک اسید با غلظت 5/0 مولار حل شد، خشک و منجمد شد و سپس توسط (edc) n-(3-dimethylaminopropyl)-n^ethylcarbodiimide hydrochloride و n-hydroxysuccinimide (nhs) و در بافر3-(n-morpholino)ethane sulfonic acid (mes) اتصال عرضی داده شد، شسته شد و مجددا خشک و منجمد شد. در این آزمایش با استفاده از آزمون طیف ستجی تبدیل فوریه مادون قرمز (ftir) و بررسی تفاوت شدت قله ها در طول موج های عبوری در نمونه های اتصال عرضی شده و اتصال عرضی نشده اثر اتصال عرضی به عنوان یک فرآیند تحکیم کننده پیوند مشاهده شد همچنین با استفاده از تغییر دادن غلظت محلول کلاژن، انجام آزمون های مکانیکی توسط روانه سنج (رئومتر) آنتون پار و تصویربرداری با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی (sem) این نتیجه به دست آمد که در میان غلظت های 5 و 10 و 20 میلی گرم بر میلی لیتر محلول کلاژن، بالاترین غلظت بیشترین مدول ذخیره و همچنین مطلوب ترین اندازه تخلخل را دارد. دامنه اندازه حفرات غشای کلاژنی به دست آمده از محلول با غلظت 20 میلی گرم بر میلی لیتر و اتصال عرضی داده شده با نسبت 1:1 edc:nhs= در بازه 27 تا 96 میکرون بوده است که در مقایسه با نمونه های تجاری هماهنگی خوبی دارد. در ضمن با توجه به عدم مقایسه اثر نسبت اتصال دهنده های عرضی روی مدول ذخیره در کارهای قبلی با آزمایش روی نسبت اتصال دهنده عرضی این نتیجه گرفته شد که نسبت 1:1 edc:nhs= برای اتصال دهنده عرضی نتیجه بهتری در استحکام مکانیکی نمونه ها می دهد. بیشترین مدول ذخیره برای غشای کلاژنی به دست آمده از محلول با غلظت 20 میلی گرم بر میلی لیتر و اتصال عرضی داده شده با نسبت 1:1 edc:nhs= بود که در حدود 58/4 مگاپاسکال به دست آمد که در مقایسه با همین غلظت کلاژن اما با نسبت اتصال دهنده عرضی 2:1 edc:nhs= 37% افزایش را نشان می داد.با به کار بردن یک نمونه اتصال عرضی داده نشده به عنوان نمونه شاهد و مقایسه تصویر sem آن با نمونه های اتصال عرضی داده شده به هم پیوستگی بیشتری در نمونه های اتصال عرضی داده شده مشاهده شد. علاوه بر این اتصال عرضی دادن موجب افزایش دامنه اندازه حفرات و زیاد شدن تفاوت آنها با یکدیگر می شود.